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了解液相色譜:原理、設備和應用

更新時(shí)間:2023-04-14      點(diǎn)擊次數:2012


了解液相色譜:原理、設備和應用

了解液相色譜:原理、設備和應用

液相色譜(Liquid Chromatography,簡(jiǎn)稱(chēng)LC)是一種重要的分離和分析技術(shù),廣泛應用于化學(xué)、生物、制藥和環(huán)境等領(lǐng)域。液相色譜中,泵是其中的核心部件之一,用于驅動(dòng)溶液通過(guò)色譜柱進(jìn)行分離。根據泵的種類(lèi)不同,液相色譜泵可以分為單元泵、二元泵和四元泵。

單元泵是簡(jiǎn)單的泵,由一個(gè)泵組件和一個(gè)阻尼器組成。泵組件內含有兩個(gè)相同的活塞泵單元,每個(gè)泵單元包括一個(gè)滾珠絲杠驅動(dòng)器和一個(gè)帶有藍寶石活塞的泵頭。微處理器控制泵的流速在1 μL-10 mL/min范圍內。液體從流動(dòng)相瓶流到入口主動(dòng)閥,第一個(gè)泵單元的入口和入口主動(dòng)閥相連。單元泵是經(jīng)常用到的泵之一,因其成本低、易于操作和維護,得到了廣泛的應用。

二元泵包含兩個(gè)相同的泵,這兩個(gè)泵集成在一個(gè)腔體內,通過(guò)高壓混合來(lái)產(chǎn)生梯度。每個(gè)通道由一個(gè)泵組件組成,包括泵驅動(dòng)器、泵頭、主動(dòng)輸入閥和輸出閥。兩個(gè)通道在一個(gè)低容積混合腔中連接,混合腔通過(guò)毛細管連接到緩沖單元(阻尼器)和混合器上。帶有PTFE過(guò)濾芯的沖洗閥裝在泵的出口處,便于向泵頭灌注流體。

四元泵包括一個(gè)真空脫氣機和一個(gè)四通道梯度泵。四通道的梯度泵包括一個(gè)高速配量閥和一個(gè)泵組件。在使用四元泵是需要注意的是:當鹽溶液和有機溶劑混合時(shí),鹽溶液可能與有機溶劑混溶,而不會(huì )出現沉淀。但是在梯度閥的混合點(diǎn)、在兩種溶劑的邊界處,可能出現微量沉淀。重力作用使鹽顆粒沉淀下來(lái)。通常,閥的A通道用于含水/鹽溶液,而泵的B通道用于有機溶劑。如果使用的是這樣的配置,鹽將落回到鹽溶液中并被溶解。當泵使用的不同配置(例如,D-鹽溶液,A-有機溶劑)時(shí),鹽可能會(huì )落到有機溶劑的端口中,從而導致性能問(wèn)題。

液相色譜中的柱子也是至關(guān)重要的部件之一。液相色譜柱是通過(guò)特定的填充物將樣品中的化合物分離開(kāi)來(lái)的。填充物通常是非極性或極性材料,具有不同的分子大小和化學(xué)性質(zhì)。液相色譜柱的選擇和優(yōu)化是分析方法開(kāi)發(fā)中至關(guān)重要的步驟。

在液相色譜中,流動(dòng)相的選擇也是非常重要的。流動(dòng)相是溶解樣品的溶劑,它在柱子中流動(dòng)并將樣品分離開(kāi)來(lái)。流動(dòng)相可以是單一溶劑,也可以是多種溶劑的混合物?;旌衔镏胁煌軇┑谋壤梢哉{整,以達到不同的分離效果。流動(dòng)相的選擇和優(yōu)化是影響液相色譜分離效果和靈敏度的重要因素之一。

除了液相色譜,還有氣相色譜(GC)和質(zhì)譜(MS)等其他色譜技術(shù)。GC是將樣品分子通過(guò)在固定相(通常是固體填充柱)和氣相之間傳輸來(lái)分離和分析的技術(shù)。MS是一種使用磁場(chǎng)分離和分析分子的技術(shù),通常與色譜技術(shù)結合使用。液相色譜和其他色譜技術(shù)結合使用可以提高分析效果和檢測靈敏度。

液相色譜是一種廣泛應用于生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)和工業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域的分析技術(shù)。對于液相色譜的實(shí)驗操作,理解和掌握液相色譜系統的核心部件和優(yōu)化方法是非常重要的。同時(shí),深入了解液相色譜柱、流動(dòng)相和其他相關(guān)技術(shù)也可以提高分析的效果和靈敏度。


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